一、PCR耗材為什么一般都是PP材質(zhì)的呢?
答:PCR/qPCR耗材一般都是聚丙烯(PP)材質(zhì),因其為生物學(xué)惰性材料,表面不易于粘附生物分子,且有著良好的化學(xué)耐性,及溫度耐受性(可121度高壓滅菌,也可以承受熱循環(huán)過程中的溫度變化)。
這些材料通常會(huì)與試劑或者樣品直接接觸,因而在生產(chǎn)制備過程中需要選用高質(zhì)量的材料和良好的加工工藝。
二、不同體積的PCR 管/板,我該怎么選呢?
答:PCR管的體積大多數(shù)都可以滿足PCR反應(yīng)要求。但是在滿足實(shí)驗(yàn)要求的基礎(chǔ)上,優(yōu)先推薦選用低容管哦。因?yàn)榈腿莘磻?yīng)管/板有著較小的上方空間,可提高熱傳導(dǎo)率并降低蒸發(fā)。而且在加樣時(shí),需要避免加樣過量或過少。
過量會(huì)導(dǎo)致熱傳導(dǎo)率下降,溢出及交叉污染,而加樣過少可能會(huì)造成樣品蒸發(fā)損失。大家可依據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求選用更合適的產(chǎn)品。
常見反應(yīng)管規(guī)格及體積:
單管/聯(lián)管:5mL,0.2mL, 0.15mL
96孔板:0.2mL, 0.15mL
384孔板:0.04mL
三、為何有的PCR管是平蓋,有的是凸蓋呢?
答:當(dāng)樣品量較少時(shí),都會(huì)優(yōu)先選用單管或者連管。但是當(dāng)反應(yīng)體積需求較大時(shí),單管可達(dá)到0.5mL呢。平蓋和凸蓋各有優(yōu)點(diǎn)呢,可參考下面的信息。
四、不同顏色的PCR 管/板,我該怎么選呢?
答:對于普通的PCR反應(yīng)選用透明或者彩色的PCR管都是可以的,而彩色透明的PCR管更有助于進(jìn)行樣品分類管理哦。
但qPCR更推薦選用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。
由于qPCR需要實(shí)時(shí)定量檢測熒光信號(hào)強(qiáng)度,更需要靈敏、精確的熒光信號(hào)傳遞。與傳統(tǒng)的透明PCR產(chǎn)品相比,白色PCR產(chǎn)品可最大程度地反射熒光信號(hào),減少孔間信號(hào)交叉污染,可優(yōu)化實(shí)時(shí)熒光定量PCR的結(jié)果。
五、PCR板/管材質(zhì)厚度不一,是不是厚點(diǎn)的穩(wěn)定性更好呢?
答:一般分為無裙邊、半裙邊、全裙邊。
無裙邊板:可適用于大多數(shù)的PCR儀或qPCR儀,但不適用于自動(dòng)化、應(yīng)用。移液過程中穩(wěn)定性不高,需要配合板托使用。
半裙邊板:可適配標(biāo)簽或應(yīng)用條碼,及自動(dòng)化應(yīng)用,且有著較好的移液穩(wěn)定性。
全裙邊板:非常適用于自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,也可適配標(biāo)簽及應(yīng)用條碼。機(jī)械強(qiáng)度較好,可適用于凸出模塊的PCR儀,且移液過程中穩(wěn)定性高。
六、96和384孔板切角和標(biāo)識(shí)不同?
答:A切角:PCR板的切角位置選擇取決于適配儀器要求,便于定位。
B標(biāo)識(shí):PCR板的數(shù)字字母標(biāo)記有助于識(shí)別單個(gè)孔及樣品位置。
一般為凸出的顏色數(shù)字標(biāo)識(shí)或者印刻標(biāo)識(shí)。對于一些自動(dòng)化應(yīng)用實(shí)驗(yàn),印刻標(biāo)記的反應(yīng)板密封性會(huì)更好。
七、為什么有的PCR板孔緣是升起的?
答:常見的PCR板有平孔緣和加高孔緣兩種。
平孔緣的反應(yīng)板,可適用于大多數(shù)的PCR儀。
升孔緣的反應(yīng)板,便于封膜,可降低樣品間的交叉污染風(fēng)險(xiǎn)。
八、PCR封板膜有多種類型,哪種好?
答:根據(jù)具體的PCR實(shí)驗(yàn)要求選用適配的高質(zhì)量封板膜,不僅有效保護(hù)樣品,防止污染,還提供可信賴的實(shí)驗(yàn)檢測數(shù)據(jù)。
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