來自lims2實驗室管理系統(tǒng)的小趣搜了好多資料,才整理出來PCR實驗室設(shè)計建造的核心問題-避免污染,控制污染源。
PCR試驗室的污染源來自那里?都有哪些?
十余年從事試驗室規(guī)劃建造,從行業(yè)經(jīng)驗總結(jié)剖析,關(guān)于PCR試驗室污染源,主要來自兩個方面:
1、樣本間污染,搜集樣本的容器有污染、樣本沒密封好溢出、樣本移液進程忘掉換槍尖、忘掉帶濾芯槍尖、用于移液的試驗器具沒有及時消毒滅菌、不同樣本一起開蓋等導(dǎo)致氣溶膠形成擴散,從而導(dǎo)致穿插污染。
2、試驗試劑污染,是指在 PCR 試驗室分試劑加樣進程中,由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣進程中,因為PCR試劑對溫度非常靈敏,需求通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃,但這個進程也充溢污染危險。
PCR試驗室
PCR試驗室規(guī)劃的核心問題是什么?有哪些方面的內(nèi)容?
PCR試驗室平面布局、氣流控制、空調(diào)通風(fēng)體系、潔凈體系等都是圍繞一個問題——核心問題——“避免污染”,WOL經(jīng)驗,不論哪個根本的醫(yī)院在建造PCR試驗室時,都必須提前考量許多要素,來保證標(biāo)本的質(zhì)量和試驗室的生物安全問題。WOL建造的PCR試驗室一般會有“四區(qū)”的設(shè)置標(biāo)準(zhǔn),試劑預(yù)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、PCR擴增檢測區(qū)、擴增產(chǎn)品檢測區(qū),且每個區(qū)獨立,并設(shè)置緩沖區(qū),每個區(qū)通過氣壓調(diào)理,促進PCR試驗進程中的試劑、標(biāo)本避免受氣溶膠的污染,一起降低擴增產(chǎn)品對人員、環(huán)境的污染。
PCR試驗室規(guī)劃
如何避免PCR試驗室污染問題?采取哪些措施?
1、WOL做過的PCR試驗室,一般都建議進入試驗室的人員,必須要嚴(yán)格訓(xùn)練后上崗,這樣核酸污染的危險較低,但如果在防疫區(qū)工作量較大的情況下,也會形成核酸污染的問題,需求正確佩戴好手套,正確運用生物安全柜,保證生物安全柜的整齊、還有通風(fēng)口堵塞情況。針對核酸檢測方面,每次檢測完要運用百分之75的酒精消毒,運用核酸去除劑對儀器進行無污染。
2、還有一點,WOL以為要盡可能避免污染,首選是防備,所以要做好防備工作,而不是掃除。在防備方面,要做到,工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分,每個試驗室區(qū)域有明顯的符號,從而避免不同試驗室區(qū)域的設(shè)備、試驗儀器、試驗室試劑、試驗室標(biāo)本等發(fā)現(xiàn)混雜。也要合理做好空調(diào)通風(fēng)體系布局設(shè)置,WOL建議盡量選用全送全排的空調(diào)體系,做好每個不同試驗室區(qū)域的氣流壓力控制要求。
3、做好臨床基因擴增檢測試驗室環(huán)境消毒清潔,參照《臨床基因擴增試驗室工作標(biāo)準(zhǔn)》進行清潔、消毒處理。不同試驗室區(qū)域應(yīng)當(dāng)有各自的清潔用具,不可以混雜。嚴(yán)格遵守清潔原則,有潔凈區(qū)向污染區(qū)進行清潔,一般從預(yù)備區(qū),到標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū),再到產(chǎn)品檢測區(qū)。PCR室內(nèi)的消毒應(yīng)避免揚塵、殺滅DNA或RNA的基因片段??蛇x擇懸掛紫外線燈管進行空氣消毒,試驗前照耀30-60分鐘,試驗完畢照耀30-60分鐘,必要時延伸照耀時間(可照耀一夜)。
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PCR實驗室根據(jù)使用儀器的功能合理設(shè)置各個工作區(qū)域,如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng):則設(shè)置試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨的工作區(qū)域,這是最常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的,還需增設(shè)樣品粉碎區(qū)。若使用實時熒光PCR法:基因擴增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個房間內(nèi);采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的全自動化PCR分析儀,則標(biāo)本制備區(qū)、擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個區(qū)域,因此PCR實驗室原則上設(shè)置五個區(qū)或四個區(qū)或三個區(qū)或二個單獨的工作區(qū)。2022年3月28日 18:15